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Preguntas frecuentes (FAQ) y respuestas

julio 9, 2018

FAQS

 

 

Frasco orquideas

Tarrina, Bote, Frasco

Se llama asi, DeFlasking al proceso de sacar definitivamente las plantulas de orquideas de su alojamiento invitro. Hasta ese momento, las plantas de orquideas han estado protegidas y creciendo en un medio de cultivo, sin incidencias del exterior, no han necesitado agua ni ventilación, ni abono, todo ello en un ambiente aséptico dentro de un frasco, tarro, bote, tarrina, matraz, tubo de ensayo, etc. El proceso de extracción y aclimatación de las plantulas al aire libre debe de realizarse por fases y de manera controlada: vea la guía para el procedimiento de DeFlasking de su planta de Orquidea Invitro en este enlace: DeFlasking Orchid Invitro

Category: Deflasking

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Cuanto mayor tiempo estén creciendo protegidos en el interior del tarro mejor, siempre y cuando no se aprecie que se dañan entre ellos, se amontonan, les falta espacio y crecen encima unos de otros, degradación del medio, etc.  Si su protocormos crecen bien, déjalos hasta que empiecen a formar hojas o raíces, al menos por periodos de varios meses. También es importante saber cuantas semillas debemos plantar y para no provocar situaciones de falta de espacio, siembre solo unas pocas semillas en cada tarro.

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La contaminación del medio de cultivo se debe a la presencia de organismos patógenos.

Estos, bacterias, hongos o levaduras, entre los mas usuales, son trasladados al interior de los tarros en su manipulación, antes o durante el proceso de siembra.

Puede haber también una mala esterilizacion o en algunos casos estos patógenos son adicionados junto con las semillas o plántulas.

Cualquier contacto con partes, superficies o zonas infectadas, sin suficiente desinfección o sin esterilizacion como material de ayuda pinzas, jeringas, guantes, etc, incluso el material vegetal poco o mal desinfectado, puede provocar la aparición de contaminación.  

El proceso de cierre de tapas y precintado de las mismas, asi como la abertura para la siembra son momentos críticos que hay que cuidar. No deposite la tapa por su parte interior en contacto con otras superficies. No toque el interior del tarro con otros instrumentos, incluso si cree que están bien desinfectados. Si puede, y no realiza la practica dentro de la Glovebox, flamee los útiles antes del contacto con el material vegetal.

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Cuanto mayor tiempo estén creciendo protegidos en el interior del tarro mejor, siempre y cuando no se aprecie que se dañan entre ellos, enredan hojas y/o raíces, falta de espacio para las plántulas, a lo ancho y a lo alto,, decoloración de hojas, degradación del medio.  Si tus plántulas o protocormos crecen bien, déjalos al menos por periodos de varios meses en cada medio.

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En cualquier fase del proceso, desde la etapa inicial, con tarros sin cultivar aun y con medio esterilizado, se puede dar el caso de que aparezca contaminación.  Es importante detectar la contaminación cuanto antes y actuar. 

Las opciones que tenemos serán las siguientes:

 

 

 

Frascos con Medio

Contaminación

Acción Cultivo

Acción Frasco

Sin semillas

Inicio

Desechar el contenido ​​ 

Limpiar​​ -​​ Desinfectar​​ 

Esterilizar

​​ Reutilizar Frasco

 

Media

Desechar el contenido​​ 

Limpiar​​ -​​ Desinfectar​​ 

Esterilizar

​​ Reutilizar Frasco

 

Avanzada

Desechar el contenido​​ 

 

No Reutilizar Frasco

Con semillas

Inicio

Desechar el contenido​​ 

 

Limpiar​​ -​​ Desinfectar​​ 

Esterilizar

​​ Reutilizar Frasco

 

Media

Desechar el contenido​​ 

 

Limpiar​​ -​​ Desinfectar​​ 

Esterilizar

​​ Reutilizar Frasco

 

Avanzada

Desechar el contenido​​ 

 

No Reutilizar Frasco

Con protocormos

avanzados

Inicio

Extraer el contenido no afectado - ​​ Limpiar - Desinfectar – Replantar en Medio nuevo

Limpiar​​ -​​ Desinfectar​​ 

Esterilizar

​​ Reutilizar Frasco

 

Media

Desechar el contenido​​ 

 

Limpiar​​ -​​ Desinfectar​​ 

Esterilizar

​​ Reutilizar Frasco

 

Avanzada

Desechar el contenido​​ 

 

No Reutilizar Frasco

Con plántulas

Inicio

Extraer el contenido no afectado - ​​ Limpiar - Desinfectar – Replantar en Medio nuevo

Limpiar​​ -​​ Desinfectar​​ 

Esterilizar

​​ Reutilizar Frasco

 

Media

Extraer el contenido no afectado - ​​ Limpiar - Desinfectar – Replantar en Medio nuevo​​ 

Limpiar​​ -​​ Desinfectar​​ 

Esterilizar

​​ Reutilizar Frasco

 

Avanzada

Desechar el contenido​​ 

 

No Reutilizar Frasco

 

Solución para desinfectar protocormos y plántulas:​​ 

Agua Oxigenada al 3%​​ 

Tiempo de tratamiento: inmersión 15 minutos

En Glovebox o Cámara de flujo

 

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Se denomina asi, formula del tomate, a la formula de medio de cultivo para orquideas invitro cuyo principal componente es el jugo de tomate, además de otros nutrientes. Esta formula tiene la característica de ajustar por si sola el ph del medio. Esta reconocida como una buena formula casera para iniciarse en el cultivo invitro.

Su ingredientes principales y basicos, aunque pueden en algo,  son:

Formula de Tomate

-250g. de tomate maduro y sanos, hacer pure y colar en un colador muy fino
-10g. de agar agar
-15g. de azucar
-1.2g. de tiamina
-900ml. de agua destilada

Se usan además otras formulas caseras similares, con buenos resultados.

Formula de Plantano

-100g. de platano hecho pure o licuado
-10g. de agar agar
-15g. de azucar
-1.2g. de tiamina
-900ml. de agua destilada

Formula de la Piña

-200ml. de jugo de piña dulce y madura
-10g. de agar agar
-15g. de azucar
-1.2g tiamina
-800ml. de agua destilada

Formula de Tomate y Platano

-40g. de platano hecho pure
-100ml. de jugo de tomate
-10g. de agar agar
-20g. de azucar
-1.2g tiamina
-800ml. de agua destilada

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Medio de cultivo F01

Medio de cultivo formula I – Parte 2 de 2

Existen muchas formulas para la fabricación de medios de cultivo para orquideas. Entre las formulas caseras de medio de cultivo esta el basado en el jugo tomate. Otros pueden añadir también, patata, piña, plátano, agua de coco, incluso otros jugos de fruta, además de azúcar, carbon vegetal, vitaminas, fertilizantes naturales, y otros compuestos. El medio Knudson se ha usado con buenos resultados en el cultivo invitro, con la adición de otros componentes. La formula mas usada por la mayoría de los aficionados y el sector profesional es la compuesta por  agua destilada, sacarosa, agua de coco, carbon activado, medio Murashige y Skoog (MS) y agar bacteriológico.

Tags: cultivo, medio

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Mediante el uso de autoclave o en olla a presion. El método consiste en someter al medio de cultivo a altas temperaturas, 120º, a alta presion, durante un tiempo mínimo, entre 15 y 20 minutos. Todo lo que tenga contacto con el medio debe estar esterilizado: medio de cultivo, tarro o envase PP(5), y sus respectivas tapaderas.

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El medio fabricado puede ser almacenado en tarros en lugar seco y oscuro, sin semillas siempre que sean esterilizados y cerrados.

También puede ser congelado, en tarros individuales o en contenedor para varios tarros, en este caso no es necesario esterilizar antes.

Tenga en cuenta que el paso del tiempo, además de otros factores, en todos las formas de conservación, puede degradar el medio de cultivo.

Algunos medios de cultivo no reaccionan bien cuando son calentados después de haber sido esterilizados, provocando que el mismo se licue y no llegue a solidificar de nuevo.

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Los tarros con medio de cultivo pueden ser almacenados en un lugar limpio, seco, a temperatura moderada, (menos de 25º) y sin luz, siempre que no contengan semillas, estén esterilizados y bien cerrados. Esto nos permitirá tener tarros de reserva, que en condiciones optimas duraran por varios meses sin degradarse. Otra opción es conservar medio suficiente en el congelador, en un solo envase o contenedor, del que se extraerán porciones a medida que se necesite, siendo en ese momento esterilizados.

Tags: medio, tarros

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No es aconsejable usar el mechero de alcohol dentro de la GloveBox por varias razones: el espacio que tenemos es reducido y cualquier movimiento al usar el material puede provocar que el mechero caiga provocando accidentes con fuego. Además de eso, al estar cerrada la GloveBox, su uso consumirá el oxigeno de dentro, apagándose en pocos minutos. Otros líquidos inflamables que se encuentren en la GloveBox corren el riesgo de incendiarse.

Categories: Alcohol, Flamear

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El mechero de alcohol posibilita flamear instrumentos, para asegurarnos que están completamente esterilizados, pero debemos tener en cuenta algunas medidas de seguridad con su uso. El alcohol es altamente volátil e inflamable, generando altas temperaturas en su llama. Asegúrese de no verter líquidos inflamables, incluido alcohol, cerca del mechero. Asegúrese de que no se ha manchado con liquido inflamable antes de acercar sus instrumentos a la llama del mechero.

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La olla deberá perder toda la presión y estar en condiciones de ser abierta. Una vez realizada esta operación, y antes de manipular los tarros, asegúrese de que tienen baja temperatura. Tenga cuidado de no quemarse, usando para ello guantes de cocina que le aíslen del calor. También puede esperar con la olla cerrada a que se enfríen por completo.

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No cerrar del todo los tarros. Para esterilizar es suficiente con colocar la tapa encima del tarro sin roscar del todo. Además de eso, coloque una funda de papel de aluminio sobre la tapa y presione alrededor para ajustar al tarro. Recuerde que dentro de la olla , el elevado aumento de la presion puede provocar que los tarros exploten si están fuertemente cerrados.

Category: Esterilizacion

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