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Medio de Cultivo: Piña

agosto 8, 2020

Después de algunos meses de desarrollo en los frascos, las plántulas necesitan ser de nuevo reubicadas: Medio de Cultivo: Piña…

Tecnopica.com - Especies invitro Orquideas - semillas Bletilla striata

Segunda fase Invitro- Medio de Cultivo: Piña

Estas plántulas de Orquídeas, que ahora vamos a traspasar a nuevos frascos, han alcanzado un nivel de desarrollo considerable en su primera fase Invitro.

Las semillas de Orquídea se ha desarrollado en medio MS con adición de vitaminas, además de los componentes habituales de la fórmula que utilizo…

Para más información sobre el medio de cultivo, las semillas, modo de desinfección y siembra de las mismas podéis consultar este artículo: Repicar plántulas de Orquídeas.


De la especie Bletilla Striata se realizó un cultivo de cuatro frascos en Marzo de 2020 – Podéis encontrar detalles en esto otro artículo.

Un frasco de los sembrados sufrió de contaminación en el inicio de la germinación, a pesar de haber pasado un periodo previo de 15 días en observación.

Sospecho que alguna cumulo de semillas no quedo bien esterilizado y cuando empezó la geminación provocó la aparición de hongos.

Tuvo que ser desechado.

El resto de los frascos han evolucionado bien y contienen una cantidad excelente de plántulas desarrolladas que ahora podrán ser repicadas.

De la especie lc. Hsinying Caterine «Dogashina» x C.Lueddemaniana se realizó un cultivo de dos frascos en Enero de 2019 y otros tantos en Mayo, Junio y Septiembre – Podéis encontrar detalles en esto otro artículo.

Otros cultivos han sido frascos de Phalaenopsis blanca, Phalaenopsis purpura, Phalaenopsis arlequín.

Para más información sobre estas especies puedes ver también el siguiente artículo: Como cultivar Semillas de Orquídeas.

Ultima fase Invitro – Repicar plántulas de Orquídeas.

Llega un momento, en toda germinación Invitro, en el cual se hace necesario el cambio de «sustrato».

A esta operación se le conoce como «repicar», y no es más que pasar de un frasco a otro con medio nuevo un número determinado de protocormos o plántulas, según sea el caso.

Este proceso se debe repetir incluso varias veces a lo largo del cultivo, hasta alcanzar plántulas preparadas para salir a Ex vitro.

Para esta operación de «repique», con plántulas más desarrolladas, he cambiado el medio de cultivo, de la forma que os describo a continuación.

Medio de cultivo – MS+JP

Los ensayos para conseguir un medio adecuado con el cual repicar plantulas de Orquideas son bastante conocidos.

En mi caso, siempre utilizo el medio MS (Murashige and Skoog medium 1962 ) y no he usado nunca otras fórmulas caseras como la del tomate o de la patata.

Las últimas concentraciones llevan añadido vitaminas, B1 y complejos del grupo B y C.

También, en alguna ocasión, he añadido Ácido acetilsalicílico, unos miligramos por litro de medio, auxinas y citoquininas.

Para este repique he seguido el estudio realizado por Seir Antonio Salazar-Mercado, que se describe en el Acta Agronómica – Acta Agron., Volumen 61, Número 1, p. 69-78, 2012. ISSN electrónico 2323-0118. ISSN impreso 0120-2812.

Germinación asimbiótica de semillas y desarrollo in vitro de plántulas de Cattleya mendelii Dombrain (Orchidaceae)Asymbiotic seed germination and in vitro seedling development of Cattleya mendelii Dombrain (Orchidaceae)

En el mismo, se desarrolla diferentes cultivos Invitro con adición de diferentes compuestos, realizando una comparativa del desarrollo según la fase de germinación y crecimiento.

Os dejo el enlace al estudio:

ACTA:https://revistas.unal.edu.co/index.php/acta_agronomica/article/view/32463/32852

He optado por usar Medio Ms con adición de vitaminas + Jugo de Piña, ya que se han observado avances significativos en el desarrollo de las plántulas germinadas que cuentan con tejido radicular creado.

Medio Ms basal y vitaminas.

Os dejo esta imagen con la formulación del medio, para estudio y comparación.

Piña Natural.

La Piña Natural, igual que el Coco Natural, no es difícil de encontrar en el mercado en cualquier temporada.

Si no la encontráis en forma natural como piezas de frutas en vuestra zona, usad los envasados.

Podéis adquirirlos como zumos naturales envasados, en este caso aseguraos que sean 100% naturales sin azúcares añadidos.

El procedimiento para la preparación del jugo es sencillo, corte de cáscara y limpieza de nudos, troceado y licuado.

Piña Natural Tecnopica.com

Es necesario filtrar la mezcla resultante.

Los filtros de café hacen buen trabajo eliminando pulpa y posibles impurezas.

El resto de procedimientos de preparación del Medio de Cultivo, periodos de incubación y esterilización no cambian con respecto a otras fórmulas.

Este medio está indicado en fase final de crecimiento en flask.

Comprobar y reajustar el ph.

Se hace necesario calibrar después de añadir el zumo de piña, antes de añadir el agente gelificante.

El medio puede bajar hasta valores de 2,08 o 3,05 en la escala ph.

Use un agente alcalino para subir el ph.

Puede preparar una disolución para un gotero de Bicarbonato de Sodio, que añadirá hasta obtener el nivel de ph 5,75 o 5,8 máximo.

Una vez calibrado y añadido el agente gelificante el resto de procedimientos es el habitual hasta la siembra.

MEDIOS DE CULTIVOS EXPERIMENTADOS

COMPUESTO

Por orden de mezclado

Formula Origen

½ Dosificación

Variante 1

Variante 2

Variante 3

Variante 4

Variante 5

Aguas destilada

1000 ml

500 ml

500 ml

500 ml

500 ml

500 ml

500 ml

Sacarosa

20 g

10 g

10 g

10 g

10 g

10 g

10 g

Medio MS​​ 

2,21 g

1,105 g

1,105 g

1,105 g

1,105 g

1,105 g

1,105 g

Carbón Vegetal​​ (Opcional)

 

 

1 g

 

1 g

 

 

Carbón Activado

2 g

1 g

 

1 g

 

1 g

1 g

Agua de coco Filtrada

100 ml

50 ml

50 ml

50 ml

50 ml

50 ml

 

Zumo de Piña natural​​ ​​ Filtrado

100 ml​​ 

 

 

 

 

 

50 ml

 

 

 

 

 

 

 

 

Ajustar PH medio a:

5.70

5.70

5.70

5.70

5.70

5.70

5.75

 

 

 

 

 

 

 

 

Agar Culinario opcional)

 

 

5 g

5 g

 

 

 

Agar Bacteriológico

6 g

3 g

 

 

3 g

4 g

4 g

Clorhidrato de tiamina​​ 

 

 

 

 

 

 

300 mg

 

Formula Origen:​​ Dosificación original.

 

½ Dosificación:​​ Dosificación original reducida al 50%

 

 

Variante 5:

 

Dosificación modificada:​​ 50% original.

Uso de carbón activado y​​ agar​​ ​​ bacteriológico.

Ajuste de pH a 5,75 – Añadir gotero Solución bicarbonato sódico.

Buena disolución de compuestos.

Sin restos ni impurezas.

Sin decantación.

Gelatinización en diferentes consistencias según gramos​​ de Agar: 4 g para ½ ​​ litro de agua destilada.

Sustitución de Agua de coco por Zumo de pina natural Filtrado

Añadido vitamina B1 en forma de Clorhidrato de tiamina.

 

 

 

Vídeo:

Os dejo un video con detalle de todo el proceso de preparación del medio con Zumo de Piña natural.

Podreis ver tambien los nuevos frascos para envasado individual de plántulas, que estoy ensayando además de otros mayores para protocormos y callus.

Los pequeños son de pp5 de 40 ml y con tapa «clic».

Permiten colocar plántulas individualmente, principalmente para muestras.

Me lo solicitan algunas floristerías de la zona, principalmente para ofrecer como obsequio a sus clientes.

Espero que probéis esta fórmula y me dejéis algunos comentarios.

Más enlaces relacionados: Medios de Cultivo


Si tienes alguna duda sobre tus plantas de:

 

Orquídeas, Cactus, Suculentas, Carnívoras o Lithops

 

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También puedes consultar la sección:

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  1. Hola CARLOSBR, gracias por tu comentario. Los sustratos que puedes usar son muchos y variados, todos ellos y sus mezclas…

  2. Me podrias indicar otras clases de sustrato que usas y sus mezclas, tengo varias plantas en arlita.

  3. Hola Miguel, En este momento no tenemos frascos disponibles. Te avisaremos en el momento que cambie la actual situación. Muchas…

  4. Buenas tardes. Veo en el apartado deflasking que dan instrucciones para cuando se reciben las plántulas, ¿esto da entender que…

  5. Interesante tu aportación a este artículo, tendremos en cuenta tus indicaciones. Gracias por tu comentario LUISMIH

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