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Preguntas frecuentes (FAQ)

julio 9, 2018

FAQS

 

 

Semillas directamente: En sobres de papel filtro o jeringuilla. 10 minutos.

Opción 1.- Mediante la inmersión en una solución de agua destilada esterilizada y Agua Oxigenada 110 volúmenes, en una proporción de 70% de agua destilada esterilizada y 30% de agua oxigenada 110v.

Alternativo Opción 2.- Mediante la inmersión en una solución de agua destilada esterilizada y lejía comercial, en una proporción de 70% de agua destilada esterilizada y 10% de lejía.

Capsulas de Semillas: directamente exterior de la capsula. Realizar paso 1 y 2

Paso 1.- Mediante la inmersión en una solución de alcohol 70º. Por 5 minutos

Paso 2.- Mediante la inmersión en una solución de agua destilada esterilizada y lejía comercial, en una proporción de 70% de agua destilada esterilizada y 30% de lejía. Por 10 minutos

Enjuagar dos veces con agua destilada esterilizado durante 1 minuto cada vez.

Enlace 1

Enlace 2

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pHMetro

calibración pHMetro PH002-MODELO

La mejor manera es con un instrumento profesional.

En el ámbito casero a nivel aficionado, con el uso de un pHMetro de dos dígitos, uno mas un decimal,  que este bien calibrado será suficiente para nivelar el medio de cultivo al ph adecuado, consiguiendo buenos resultados en el progreso de las semillas o material vegetales.

Opcionalmente, otros medidores de bolsillo con mas dígitos nos darán resultados mas precisos.

 


 




 

Tags: ph, phmetro

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ph

pHMetro

Para la medición de pH del medio de cultivo realizado de forma casera se pueden usar  varios métodos, siendo los mas usados mediante la calibración por color con tiras de papel reactivo o mediante phMetro digital de bolsillo.

Estos métodos son fiables, mas preciso el digital, y económicamente viables a nivel aficionado. Por su precisión y mejores resultados los pHMetro digitales son bastante usados, con dos dígitos, un mas un decimal o algo mas preciso con tres dígitos, uno mas dos decimales.

 


 




 

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Para bajar o subir el ph del medio se pueden utilizar componentes químicos o naturales, ácidos y básicos.

Los componentes ácidos bajan el ph y entre los mas usados en el cultivo de orquideas a niveles caseros, por ser sencillo de conseguir, está el acido clorhídrico, también llamado acido muriático, espíritu de sal, acido marino, acido de sal o todavía ocasionalmente llamado, acido hidroclórico, agua fuerte o salfuman , es una disolución acuosa del gas cloruro de hidrogeno (HCl).

Precaución: producto toxico y corrosivo.

Productos toxicos

Usar sin diluir, gota a gota.

Wikipedia: Ácido_clorhídrico


 

Los componentes básicos suben el pH y entre los mas usados en el cultivo de orquideas a niveles caseros,  por ser sencillo de conseguir, está el bicarbonato de sodio (también llamado bicarbonato sódico, hidrogenocarbonato de sodio, carbonato ácido de sodio o bicarbonato de soda, ( NaHCO3).

Wikipedia: Bicarbonato_de_sodio

Usar disuelto en agua destilada, a razón de una cucharilla rasa de café disuelta en 100 ml de agua destilada.

pHMetro

Medidor pHMetro

 


 




 

Tags: ph, phmetro

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Papel reactivo ph

Papel reactivo ph comprobacion

El medio  tiene que tener un valor de pH determinado que sea adecuado al cultivo que queremos realizar, para comprobarlo una vez fabricado, se siguen determinados procedimientos mediante el uso de herramientas o reactivos. Determinar con precisión el pH del medio nos servirá para poder ajustarlo mediante la incorporación de sustancias básicas o acidas.

 


 




 

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Frasco invitro

Invitro

Cuanto mayor tiempo estén creciendo protegidos en el interior del tarro mejor, siempre y cuando no se aprecie que se dañan entre ellos, se amontonan, les falta espacio y crecen encima unos de otros, degradación del medio, etc.  Si su protocormos crecen bien, déjalos hasta que empiecen a formar hojas o raíces, al menos por periodos de varios meses. También es importante saber cuantas semillas debemos plantar y para no provocar situaciones de falta de espacio, siembre solo unas pocas semillas en cada tarro.

 


 




 

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La contaminación del medio de cultivo se debe a la presencia de organismos patógenos.

Estos, bacterias, hongos o levaduras, entre los mas usuales, son trasladados al interior de los tarros en su manipulación, antes o durante el proceso de siembra.

contaminacion

Contaminacion en placa petri

Puede haber también una mala esterilizacion o en algunos casos estos patógenos son adicionados junto con las semillas o plántulas.

Cualquier contacto con partes, superficies o zonas infectadas, sin suficiente desinfección o sin esterilizacion como material de ayuda pinzas, jeringas, guantes, etc, incluso el material vegetal poco o mal desinfectado, puede provocar la aparición de contaminación.

El proceso de cierre de tapas y precintado de las mismas, asi como la abertura para la siembra son momentos críticos que hay que cuidar. No deposite la tapa por su parte interior en contacto con otras superficies. No toque el interior del tarro con otros instrumentos, incluso si cree que están bien desinfectados. Si puede, y no realiza la practica dentro de la Glovebox, flamee los útiles antes del contacto con el material vegetal.

 


 




 

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Cuanto mayor tiempo estén creciendo protegidos en el interior del tarro / frasco / bote, mucho mejor, aunque en algún momento tendremos que sacarlos.

Si lo que tienes es un envasado invitro,  con plantulas desarrolladas:

  • Siempre y cuando no se aprecien daños en el contenedor o la tapa y las plantulas no se dañan entre ellas, podrás esperar para abrir.
  • Si ves que falta de espacio para las plántulas, a lo ancho y a lo alto, cambia la coloración de hojas a amarilla / marrón,  observas degradación del medio, o cualquier otro síntoma que te haga sospechar, sigue las instrucciones para su deflasking, en este articulo: DeFlasking

Si lo que tienes es un cultivo invitro en alguna de sus fases:

  • Observa el crecimiento y cuando veas que falta espacio o existe amontonamiento realiza un repique, es decir, cambia tus protocormos o plantulas a nuevo medio esterilizado y déjalas por otra fase / periodo de crecimiento.
  • Si tus plántulas o protocormos crecen bien, déjalos al menos por periodos de varios meses en cada medio.

 


 




 

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En cualquier fase del proceso, desde la etapa inicial, con tarros sin cultivar aun y con medio esterilizado, se puede dar el caso de que aparezca contaminación.  Es importante detectar la contaminación cuanto antes y actuar. 

Las opciones que tenemos serán las siguientes:

 

 

 

Frascos con Medio

Contaminación

Acción Cultivo

Acción Frasco

Sin semillas

Inicio

Desechar el contenido ​​ 

Limpiar​​ -​​ Desinfectar​​ 

Esterilizar

​​ Reutilizar Frasco

 

Media

Desechar el contenido​​ 

Limpiar​​ -​​ Desinfectar​​ 

Esterilizar

​​ Reutilizar Frasco

 

Avanzada

Desechar el contenido​​ 

 

No Reutilizar Frasco

Con semillas

Inicio

Desechar el contenido​​ 

 

Limpiar​​ -​​ Desinfectar​​ 

Esterilizar

​​ Reutilizar Frasco

 

Media

Desechar el contenido​​ 

 

Limpiar​​ -​​ Desinfectar​​ 

Esterilizar

​​ Reutilizar Frasco

 

Avanzada

Desechar el contenido​​ 

 

No Reutilizar Frasco

Con protocormos

avanzados

Inicio

Extraer el contenido no afectado - ​​ Limpiar - Desinfectar – Replantar en Medio nuevo

Limpiar​​ -​​ Desinfectar​​ 

Esterilizar

​​ Reutilizar Frasco

 

Media

Desechar el contenido​​ 

 

Limpiar​​ -​​ Desinfectar​​ 

Esterilizar

​​ Reutilizar Frasco

 

Avanzada

Desechar el contenido​​ 

 

No Reutilizar Frasco

Con plántulas

Inicio

Extraer el contenido no afectado - ​​ Limpiar - Desinfectar – Replantar en Medio nuevo

Limpiar​​ -​​ Desinfectar​​ 

Esterilizar

​​ Reutilizar Frasco

 

Media

Extraer el contenido no afectado - ​​ Limpiar - Desinfectar – Replantar en Medio nuevo​​ 

Limpiar​​ -​​ Desinfectar​​ 

Esterilizar

​​ Reutilizar Frasco

 

Avanzada

Desechar el contenido​​ 

 

No Reutilizar Frasco

Solución para desinfectar protocormos y plántulas:​​ 

Agua Oxigenada al 3%​​ 

Tiempo de tratamiento: inmersión 15 minutos

En Glovebox o Cámara de flujo

 

 


 




 

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Se denomina asi, formula del tomate, a la formula de medio de cultivo para orquideas invitro cuyo principal componente es el jugo de tomate, además de otros nutrientes. Esta formula tiene la característica de ajustar por si sola el ph del medio. Esta reconocida como una buena formula casera para iniciarse en el cultivo invitro.

Su ingredientes principales y basicos, aunque pueden en algo,  son:

Formula de Tomate

-250g. de tomate maduro y sanos, hacer pure y colar en un colador muy fino
-10g. de agar agar
-15g. de azucar
-1.2g. de tiamina
-900ml. de agua destilada

Se usan además otras formulas caseras similares, con buenos resultados.

Formula de Plantano

-100g. de platano hecho pure o licuado
-10g. de agar agar
-15g. de azucar
-1.2g. de tiamina
-900ml. de agua destilada

Formula de la Piña

-200ml. de jugo de piña dulce y madura
-10g. de agar agar
-15g. de azucar
-1.2g tiamina
-800ml. de agua destilada

Formula de Tomate y Platano

-40g. de platano hecho pure
-100ml. de jugo de tomate
-10g. de agar agar
-20g. de azucar
-1.2g tiamina
-800ml. de agua destilada

 


 




 

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Medio de cultivo F01

Medio de cultivo formula I – Parte 2 de 2

Existen muchas formulas para la fabricación de medios de cultivo para orquideas. Entre las formulas caseras de medio de cultivo esta el basado en el jugo tomate. Otros pueden añadir también, patata, piña, plátano, agua de coco, incluso otros jugos de fruta, además de azúcar, carbon vegetal, vitaminas, fertilizantes naturales, y otros compuestos. El medio Knudson se ha usado con buenos resultados en el cultivo invitro, con la adición de otros componentes. La formula mas usada por la mayoría de los aficionados y el sector profesional es la compuesta por  agua destilada, sacarosa, agua de coco, carbon activado, medio Murashige y Skoog (MS) y agar bacteriológico.

 


 




 

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Mediante el uso de autoclave o en olla a presion. El método consiste en someter al medio de cultivo a altas temperaturas, 120º, a alta presion, durante un tiempo mínimo, entre 15 y 20 minutos. Todo lo que tenga contacto con el medio debe estar esterilizado: medio de cultivo, tarro o envase PP(5), y sus respectivas tapaderas.

 


 




 

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El medio fabricado puede ser almacenado en tarros/frascos/botes en lugar seco y oscuro, siempre que haya sido sometido el y su contenido a un proceso de esterilizacion, sin que contengas semillas ni material vegetal, bien cerrados y precintados.

El medio también puede ser congelado, en tarros individuales o en contenedor para varios tarros, en este caso no es necesario esterilizar antes, fabricar y congelar inmediatamente.

Tenga en cuenta que, con paso del tiempo además de otros factores en todos las formas de conservación, puede degradarse el medio de cultivo, perdiendo facultades o terminando por no ser viable.

Algunos medios de cultivo no reaccionan bien cuando son calentados después de haber sido esterilizados, provocando que el mismo se licue y no llegue a solidificar de nuevo. El uso de agar bacteriológico, asi como en su versión culinaria, puede ser recalentado después de congelación para su esterilizacion, normalmente no presenta problemas de solidificación.

 


 




 

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Los tarros con medio de cultivo pueden ser almacenados en un lugar limpio, seco, a temperatura moderada, (menos de 25º) y sin luz, siempre que no contengan semillas, estén esterilizados y bien cerrados.

Esto nos permitirá tener tarros de reserva, que en condiciones optimas duraran por varios meses sin degradarse.

Otra opción es conservar medio suficiente en el congelador, en un solo envase o contenedor, del que se extraerán porciones a medida que se necesite, siendo en ese momento esterilizados.

 


 




 

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